熱門搜索:低溫冰箱、生化培養(yǎng)箱、鼓風(fēng)干燥箱、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、箱式電阻爐、電子天平、滅菌器等等實(shí)驗(yàn)設(shè)備
      欄目導(dǎo)航

      avigation

      網(wǎng)站首頁>技術(shù)文章 > 蛋白純化系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法與操作步驟

      蛋白純化系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法與操作步驟


      蛋白純化系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法與步驟

      凝膠過濾層析(gel filtration chromatography)法又稱排阻層析或分子篩方法,主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和形狀,即蛋白質(zhì)的質(zhì)量進(jìn)行分離和純化。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì),多是交聯(lián)的聚糖類物質(zhì),使蛋白質(zhì)混合物中的物質(zhì)按分子大小的不同進(jìn)行分離。

      蛋白純化系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法

      蛋白質(zhì)的凝膠過濾分離

      實(shí)驗(yàn)材料 蛋白質(zhì)  

      試劑、試劑盒 凝膠過濾緩沖液  

      儀器、耗材 布氏漏斗 凝膠過濾層析柱 分光光度計(jì)

      蛋白純化系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)步驟

      1.  如果凝膠過濾的介質(zhì)是干粉,則需在凝膠過濾緩沖液中*溶脹。

      2.  在遠(yuǎn)離過往通道及直接光照的恒溫環(huán)境,將層折柱垂直安裝在穩(wěn)固的實(shí)驗(yàn)室支架上。

      3.  用一注射器將凝膠過濾緩沖液從柱子的輸出管注入柱子,至緩沖液達(dá)到柱子支持體平面之上,注射器留在輸出端以堵住柱子。

      4.  沿著一根順柱子內(nèi)壁而放的玻璃棒將凝膠混懸物倒入柱子至所設(shè)高度,再小心往凝膠頂部加入1 cm 高的一層緩沖液,并連接緩沖液貯存容器,取去堵著柱子輸出管的注射器,用2~3倍柱床體積的緩沖液請洗柱子。

      5.  流盡柱子凝膠頂部上面的緩沖液、關(guān)閉其輸出管。

      6.  加入相當(dāng)于柱床體積1%~5%的蛋白質(zhì)樣品。開放輸出管,讓樣品流進(jìn)柱床,凝膠上面的柱子內(nèi)壁以緩沖液沖洗。

      7.  在凝膠頂上用吸管加入1 cm 高的緩沖液層,重新與緩沖液貯存容器連接,開始洗脫。

      8.  分部收集流出液。每分部相當(dāng)于1%總柱床體積,分別測每個(gè)分部的A280,并各取小份樣品測生物活性,選出有活性的分部用SDS-PAGE檢測所含蛋白質(zhì)的數(shù)量和質(zhì)量,合并含目標(biāo)蛋白的分部。

      9.  用2~3個(gè)柱床體積的凝膠過濾緩沖液洗柱,柱子保存在含0.02%疊氮鈉的緩沖液中,柱于可無限次地使用。


      TEL:13798128437

      掃碼添加微信
      主站蜘蛛池模板: 久久人人超碰精品CAOPOREN| 中国精品18videosex性中国| 久久e热在这里只有国产中文精品99| 日韩人妻无码精品久久久不卡| 国产av无码专区亚洲国产精品| 国产精品免费福利久久| 精品国产欧美一区二区三区成人| 99RE6热在线精品视频观看| 亚洲?V乱码久久精品蜜桃| 亚洲国产精品久久久久婷婷老年| 欧美精品久久久久久久自慰| 免费视频精品一区二区| 91精品免费久久久久久久久| 91麻豆精品视频| 久久水蜜桃亚洲av无码精品麻豆| 久久精品国产一区二区三区不卡| 97久久精品人人澡人人爽| 高清免费久久午夜精品| 少妇人妻偷人精品无码视频新浪 | 亚洲精品欧美综合在线| 国产精品对白交换视频| 无码国内精品人妻少妇蜜桃视频| 欧美日韩精品久久久久| 国产大片91精品免费观看不卡| 精品久久久久久国产91| 日韩精品少妇无码受不了| 综合在线视频精品专区| 亚洲电影日韩精品 | 欧美亚洲国产精品久久蜜芽| 国产精品久久午夜夜伦鲁鲁| 亚洲国产精品特色大片观看完整版| 欧美国产成人久久精品| 久久久久无码精品| 久久精品国产精品亚洲艾草网美妙 | 国内精品久久九九国产精品| 8AV国产精品爽爽ⅴa在线观看| …久久精品99久久香蕉国产| 99久久久国产精品免费无卡顿 | 久久亚洲国产成人精品性色| 亚洲国产精品成人久久| 无码国产69精品久久久久网站|