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      厭氧培養(yǎng)箱菌種置入操作流程及培養(yǎng)方法

      厭氧培養(yǎng)箱菌種置入操作流程及培養(yǎng)方法

      ?一、菌種置入操作流程?

      ?準備工作?

      檢查取樣室內(nèi)門是否關緊,確保操作室與外界隔絕?。

      清潔取樣室及操作手套,避免污染;確認鈀催化劑和干燥劑活性(若失效需更換或再生)?。

      ?菌種傳遞?

      打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后立即關閉外門?。

      ?氣體置換流程?:

      ?抽真空?:啟動真空泵,抽真空至壓力≥66kPa(500mmHg),停止后關閉真空閥?。

      ?充氮氣?:打開氮氣閥向取樣室充入氮氣至壓力恢復常壓,重復抽真空-充氮氣操作3次,置換殘留氧氣?。

      ?混合氣體補充?:最后一次充氣時改用混合氣體(N? 85%、H? 10%、CO? 5%),流量控制在10ml/min?。

      ?環(huán)境驗證?

      使用美蘭指示劑檢測氧濃度:若指示劑保持無色,表明操作室內(nèi)氧濃度≤1ppm,達到厭氧標準?。

      ?二、培養(yǎng)方法及環(huán)境維持?

      ?參數(shù)設置?

      設置恒溫培養(yǎng)溫度(常規(guī)35–37℃),控溫精度需達±0.3℃?。

      啟動鈀催化劑和除氧裝置,持續(xù)吸附微量氧氣并維持濕度<10%?。

      ?培養(yǎng)操作?

      通過手套操作孔進行菌種接種,避免手套破損導致氧氣滲入?。

      將接種后的培養(yǎng)基平皿或試管置于操作室內(nèi)的恒溫區(qū)域,確保風道暢通以保持溫度均勻?。

      ?長期培養(yǎng)維護?

      ?氣體補充?:每日向操作室持續(xù)通入微量混合氣體(10ml/min),通過鈀催化反應消耗殘留氧氣?。

      ?環(huán)境監(jiān)測?:每日檢查美蘭指示劑顏色變化,若變藍需重新置換氣體?。

      ?耗材更換?:每周再生鈀催化劑(160℃烘烤2小時),每1–2年更換一次;干燥劑和活性炭每1–2周更換?。

      ?三、關鍵注意事項?

      ?安全操作?

      混合氣體含氫氣,操作時遠離火源并確保設備接地良好?。

      傳遞菌種時嚴格遵循“抽真空-充氮氣"流程,避免氧氣殘留?。

      ?設備維護?

      定期校準溫度傳感器和氧濃度檢測儀,防止數(shù)據(jù)偏差?13。

      停止使用時,運行40℃以上烘干程序2小時并開門通風,防止箱內(nèi)冷凝水積聚?。

      ?異常處理?

      若氧濃度異常升高,立即暫停實驗,排查氣路泄漏或催化劑失效問題

       


      TEL:13798128437

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